产品货号：AG51105 / AG51106
¥1,600 – ¥6,000
AsCas12a (cpf1) Nuclease 是一种来源于 Acidaminococcus sp. 的核酸内切酶。本产品是将 AsCas12a Nuclease 基因序列构建至质粒，并于大肠杆菌中重组表达和纯化获得的重组蛋白。
AsCas12a 酶在 crRNA 的引导下，可在靶标双链 DNA 存在 PAM (TTTV，V=A/C/G) 序列的情况下，对靶标双链 DNA 进行特异性剪切并形成粘性末端。此外，本产品具有反式剪切活性，即当 AsCas12a 酶与 crRNA、靶标双链 DNA 结合形成三元复合物后，便会被激活针对非特异 ssDNA 序列的反式剪切活性，将体系中的任意 ssDNA 序列切碎。
| 组分 | AG51105 | AG51106 |
| AsCas12a (cpf1) Nuclease (1 μM) | 100 μl | 500 μl |
| 10X AsCas12a Nuclease Reaction Buffer | 1 ml | 5 ml |
保存温度：-20℃保存
运输温度：干冰运输或者-20℃冰袋运输
A：1% TAE 凝胶电泳分析本产品对质粒 Supercoiled pBR322 DNA 的顺式剪切效果。
M 为 λ-Hind Ⅲ digest，CK 为不含 AsCas12a 酶的对照组，11.1 nM~44.4 nM 为含有不同浓度 AsCas12a 酶的实验组。
结果表明：CK 组不含 AsCas12a 酶，无法形成 AsCas12a-crRNA 复合体，因此不会切割靶标 pBR322。而实验组中，在 crRNA
的引导下，随着酶浓度的增加，体系中 AsCas12a-crRNA 复合体的比例也随之提高，切割靶标 pBR322 形成的线性化
片段含量增加。当酶浓度达到 33.3 nM 时，靶标 pBR322 完全线性化，呈现出单一片段。
B：实时荧光定量 PCR 仪检测 AsCas12a 酶的反式剪切效果。
NC 为未添加靶标 pBR322 DNA 的对照组，Target dsDNA 为添加靶标 pBR322 DNA 的实验组。Cas12a 酶与 crRNA、靶标 pBR
322 形成三元复合体后，在 crRNA 引导下，将体系中带有荧光基团 (-FAM) 和淬灭基团 (-BHQ1) 的 ssDNA 切碎并发出荧光。
结果表明：NC 组未加入靶标 pBR322 DNA，反式活性无法被激活，体系中 ssDNA 探针无法被切割，不产生荧光；实验组加入
靶标 pBR322 DNA 后，反式活性被激活，随反应时间增加，体系中 ssDNA 探针被切割产生的荧光量增加，当探针被完
全切割后，产生的荧光信号达到平台期。
